
Cinética de las reacciones producidas en el radioinmunoanálisis (RIA) de algunas sustancias
Reaction kinetics produced in the radioinmunoassay (RIA) of some substances
SAN MARTÍN, E.; MORENO-FRIGOLS, JL.; PERIS, JE Y SAN MARTÍN, MD.
Departamento de Química Física. Sección Farmacia. Facultad de Farmacia. Universidad de Valencia.
Avda. Vicente Andrés Estellés, s/n. 46100-Burjasot. Valencia
Ars Pharmaceutica;39(1),19-28 (1998)
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RESUMEN Se ha estudiado la cinética de la unión, a sus anticuerpos específicos, de la insulina y dehidroepiandrosterona sulfato (DHEAs), como RIA en fase sólida, y de la osteocalcina y fracción c-terminal de la parathormona (c-PTH), como RIA en disolución. Para realizar el estudio cinético se ha utilizado el método diferencial. Se realizan diluciones de la concentración inicial de antígeno (Ag) y anticuerpo (Ac) comprobando las modificaciones que presenta la velocidad de reaccción. Así mismo se ha estudiado la velocidad de la reacción entre las sustancias indicadas y sus anticuerpos en función de la temperatura de incubación. La cinética de la reacción antígeno-anticuerpo en los casos estudiados (con una excepción) presenta un orden aparente inferior a uno para el antígeno. Se propone un posible mecanismo de reacción de tipo micaeliano. Dicho mecanismo es coherente con los resultados obtenidos en el estudio de la influencia de la temperatura. Palabras clave: Unión, antígeno, anticuerpo, cinética. ABSTRACT The kinetics of binding of insulin and dehidroepiandrosterone sulfate (DHEAs) to their specific antibodies were studied by means of solid phase radioinmunoanalysis. The kinetics of binding of the osteocalcine and the c-terminal human parathyroid hormone (c-PTH) were studied by means of liquid phase radioinmunoanalysis. The differential method was used in all the studies. Both, the effect of dilution of antigen (Ag) and antibody (Ab) and the effect of temperature on the reaction rate were studied. With the exception of DHEAs, for all the other antigens studied the antigen-antibody reaction showed an apparent kinetic order lower than one, and a michaelis-menten reaction mechanism is proposed. This mechanism is consistent with results obtained from the study of influence of temperature. Key words: Binding, antigen-antibody, kinetics |