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PROCEDIMIENTO:
B. Identificación de las fracciones
Cada una de las fracciones obtenidas se someterá al siguiente tratamiento:
Fracción ácida fuerte “A”. “Test de Trinder para salicilatos” (colorimetría).
Transferir 1 ml de la fracción ácida fuerte “A” a un tubo de ensayo. Agregarle 1-2 gotas de HCl concentrado para acidificarla, comprobando que se consigue el pH deseado (aprox. 2). Seguidamente agregar 1 ml del reactivo de Trinder. En caso positivo aparecerá un COLOR VIOLETA. VER FOTOS--VER SECUENCIA
Fracción neutra “N”. “Test de Heyndrickx” (colorimetría).
Agregar sobre el residuo seco de la cápsula 1,5 ml de acetona y agitar suavemente hasta que se disuelva. Si es necesario se puede usar una varilla de vidrio. A continuación, agregar 0,1 ml de ácido sulfúrico concentrado y mezclar con agitación suave (ladeando la cápsula con cuidado). Seguidamente agregar 0,1 ml de furfural al 1% en acetona. Después de extender la mezcla por las paredes con un suave movimiento de rotación, esperar unos minutos sin tocar la cápsula. En presencia de carbamatos, aparecerá un anillo violeta en 2-5 minutos sobre la pared. VER FOTOS--VER SECUENCIA
Fracción básica “B”. Espectrofotometría UV.
Registrar el espectro UV entre 220 y 360 nm. (Ver Figura 1)
Fracción ácida débil “a”.“Test general de barbitúricos” (Espectrofotometría UV).
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Marcar dos tubos como “pH 10” y “pH 13” y transferir 2 ml de la fracción ácida débil a cada uno de ellos. Al tubo “pH 10” añadirle 2 ml de una solución de cloruro potásico-borato y al tubo “pH 13” 2 ml de hidróxido sódico 0,45N. VER FOTOS
Hacer un barrido para cada uno de ellos entre 220 y 400 nm y registrar el espectro de absorción. Utilizar como blancos: para el tubo “pH 10” una mezcla a partes iguales de solución de cloruro potásico-borato e hidróxido sódico 0,45N y para el tubo “pH 13” hidróxido sódico 0,45N. VER FOTOS
Si se observa alguna respuesta al hacer el barrido, agregar al tubo “pH 10” 3-4 gotas de HCl concentrado (con lo que el pH bajará hasta aprox. 2) y repetir el barrido. Comparar los espectros obtenidos con la Figura 2 que recoge el comportamiento típico de los barbitúricos 5,5-disustituidos. VER FOTOS
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