METODOS |
Tinciones |
|
Manipulación general | ||
1-Preparación del portaobjetos |
1.1. Limpiar y desengrasar los portaobjetos. |
|
1.2. Marcar cada portaobjetos para identificar la tinción, microorganismo y autor: rotular (rotulador resistente al agua) por el lado opuesto al de la preparación; pasar lápiz graso sobre el rótulo. | ||
2- Preparación de la muestra: | 2.1-Disposición de una alícuota de la muestra sobre el portaobjetos (manejar los cultivos en condiciones de esterilidad.) |
|
Si se parte de cultivos en medio líquido se hará directamente Vídeo | ||
Si se parte de cultivos en medio sólido, una pequeña cantidad de células será suspendida en una gota de agua. Vídeo 1 Vídeo 2 | ||
2.2. Extensión de las bacterias sobre la superficie del portaobjetos Vídeo | ||
La extensión (aproximadamente 1 cm2 ) no contendrá demasiadas células. |
||
2.3. Desecación de la muestra al aire o con un calentamiento suave Vídeo | ||
2.4.Fijación :adhesión de las bacterias a la superficie del portaobjetos: Ayudarse de unas pinzas para pasar la cara inferior del portaobjetos por la llama del mechero. Son suficientes dos o tres pases rápidos. Vídeo | ||
3.Las bacterias están dispuestas para la tinción | Disponer las preparaciones en las paralelas sobre el cristalizador. Aplicar la manipulación específica de la tinción que se vaya a realizar. | |
Los colorantes deben cubrir solo la superficie de la extensión. | ||
Los lavados con agua deben ser abundantes | ||
4. Tinciones | 4.1Tinción de Gram. 4.2 Tinción de endosporas. 4.3 Tinción de ácido-alcohol resistencia | |
5-Desecación de la tinción | 5.1 Al aire, con papel de filtro (sin frotar la preparación), o al calor suave. Comprobar que los rótulos no se han borrado. | |
6Observación de la tinción |