Preparar 5 tubos de ensayo de plástico de acuerdo con la siguiente Tabla:

1. Transferir, agitando previamente, 2 ml de cada uno de los puntos de la curva patrón, (Blanco, S₁, S₂, S₃ y S₄) a su correspondiente tubo graduado de 10 ml de vidrio.   VER FOTOS

2. Transferir 2 ml del extracto problema a otro tubo graduado de vidrio de 10 ml.
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3. Añadir los siguientes reactivos al extracto y a los distintos puntos de la curva patrón: 0.2 ml del reactivo brucina-ácido sulfanílico y 2 ml de la solución de ácido sulfúrico, éste último muy lentamente. Mezclar y dejar en reposo durante 10 minutos en oscuridad.  VER FOTOS

4. Añadir 4 ml de agua destilada, agitando con la varilla de vidrio. Dejar reposar durante 15 minutos en la oscuridad y en un baño de hielo.   VER FOTOS

5. Sacar los tubos del baño hasta que alcancen la temperatura ambiente. Enrasar hasta 10 ml con agua destilada.   VER FOTOS

6. Leer la absorbancia a 410 nm frente al blanco.  VER FOTOS